Ah e tal absorve a 220 nm, que é onde absorvem os peptide bonds. Absorve a 220 nm mas é o caraças! Não admira que o detector não detectasse, que afinal o pico é a 200 nm. E isto seguindo instruções pormenorizadas de um técnico expert em HPLC e nestes péptidos em particular. Uma pessoa confia, acredita. Vá lá que de vez em quando se resolve ter iniciativa e pensar: e se eu fosse ali fazer um simples espectrozinho de UV num simples espectrofotómetro só para ter a certeza de onde absorve mesmo?
HPLC... éhe. Coisas de miúdos!
ResponderEliminar(E se falasses português?)
Lindo, estes posts fizerem-me ter umas saudades, quando estava em Portugal trabalhei no laboratório farmacetico na parte de quimica, bastante com HPLC e espectrofotómetro, que saudades, quando vim para cá afastei-me completamente da química, mas tenho tantas tantas saudedes.
ResponderEliminarBeijokas
Patrícia
Faz o UV!
ResponderEliminar"Absorve a 220 nm o caralho"..então mas e o teu pai...disseste que não dizias...
ResponderEliminarnem imaginas o que eu gosto de ouvir/ver uma mulher dizer "caralho"!
ResponderEliminarTao pequena e ja fala holandes.. :)
ResponderEliminarhey sis! Solidariedade!
ResponderEliminarPriminha:
ResponderEliminarComo já traçaste o espectro de absorção, a coisa já está solucionada.
Doravante, não olvides que o ambiente químico, o tipo de grupos funcionais (que estão ligados ao cromóforo) e a natureza do solvente (por exemplo a composição e pH do tampão) podem alterar a frequência a que é esperado o máximo de absorção, pelo que convém sempre traçar o espectro de absorção antes de ir gastar péptido e solventes de HPLC...
Beijinhos primais
É perfeitamente compreensível essa tua frustração.
ResponderEliminarMais de 98% da população não faz ideia do que estás a falar, mas deves estar chateada e tudo.
Priminho: estava a seguir o protocolo fornecido pelo técnico que quantificou os péptidos que me forneceram. Ou seja, a ideia era que eu reproduzisse os seus resultados de modo a implementar o método de quantificação, para que daqui para a frente possa trabalhar independentemente. Seria normal e esperado que o método fosse reprodutível. :S
ResponderEliminarPriminha:
ResponderEliminarPois... Os célebres protocolos fornecidos pelos técnicos, de reprodutibilidade esperada mas raramente conseguida...
Beijinhos, boa sorte e bom trabalho.
E isto não era de uma patente...
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